Hoe te vertellen als een Aptameer heeft gevonden Zijn Doel

Aptamers zijn relatief korte ketens van nucleotiden gemaakt te binden aan een specifieke doelgroep . De nucleotiden zijn dezelfde onderdelen die deel uitmaken van DNA of RNA-moleculen , en wanneer ze in de juiste configuratie zijn zetten ze zijn zeer specifiek en hebben een hoge affiniteit voor hun doelstellingen . De hoge specificiteit betekent dat de aptamer bindt alleen naar het doel het is ontworpen voor , en hoge affiniteit betekent de aptamer bindt heel gemakkelijk naar het doel .
Maar dit zijn slechts kleine moleculen , en je kunt niet zomaar een kijkje nemen en zien dat ze overeenstemmen met hun doelstellingen . Gelukkig zijn er manieren om dat aptamer krijgen om terug te melden. Er zijn twee verschillende algemene configuraties , een waarbij de aptameer bindt zijn doel intern of aan enige externe bindingsplaats , en andere waarin het doelwiteiwit bindt op twee sites.Things U
aptameer synthese apparatuur nodig
gouden elektroden en nanodeeltjes
Doelmoleculen in geschikte bufferoplossingen
Ammeter
Toon meer instructies
Single Site Binding
1

Bevestig een ferroceen complex aan een uiteinde van de aptamer . Ferroceen is een organometaalverbinding die goede elektron - overdracht eigenschappen heeft . Kopen van 2

Bouw de aptameer met een thiol groep naar de andere kant te beëindigen . De thiol groep is een zwavel - waterstof- regeling die een sterke affiniteit voor goud heeft .

Construct 3 een gouden elektrode , en laat de aptamers te hechten aan het oppervlak .

4

Dompel de elektrode in de oplossing van belang , en toezicht op de huidige . Wanneer de aptameer bindt zijn doel , zal de configuratie te veranderen en de twee uiteinden dicht bij elkaar te brengen . Dit brengt de ferroceen dicht bij de gouden elektrode , die de huidige toeneemt , zodat het toezicht op de stroom kan u vertellen hoeveel van de aptamers hebben hun targets gevonden .
Dubbele Site Binding
5 kleurverandering is een methode om bindende aptameer .

Immobiliseer ene uiteinde van een aptameer aan een vast oppervlak .
6

Breng het doelwitmolecuul in de oplossing rond de aptameren op het vaste oppervlak .
7

Construct andere aptamer specifiek aan hetzelfde doel -molecuul , en bevestig een gouden nanodeeltjes aan de andere kant.
8

Was de oplossing , dan is de invoering van een nanodeeltje groei oplossing . De groei oplossing zal extra goud afzetten op de nanodeeltjes zaden en maak een zichtbare kleurverandering waar het doel -molecuul aanwezig is. Je kunt gewoon kijken naar de oppervlakte en zie het verschil in kleur waar de aptamer zijn doel heeft gevonden .