Hoe maak je apicoplast Cells een parasiet groeien in een cultuur

Apicoplasts zijn een soort van intracellulaire organellen aanwezig in eencellige parasieten die ernstige ziekten zoals malaria , toxoplasmose en coccidiose veroorzaken . Organellen zijn complexe structuren binnen een cel die niet kan groeien en zich voortplanten door zichzelf . Ze ontstond toen een voorouder van de parasieten overspoeld ander organisme , dat waarschijnlijk was gerelateerd aan rode algen . Omdat apicoplasts geen onafhankelijke cellen niet kunnen worden in een kweek zelf . Om te groeien moet men de parasieten groeien . Wat volgt zijn instructies om de cultuur van de rode bloedcel stadium van Plasmodium falciparum , waardoor malaria.Things je nodig hebt
Parasite stock afbeeldingen RPMI 1640 kweekmedium
laminaire stroming kap
autoclaaf Albumax II serum vervanger
D - glucose
hypoxantine
HEPES
Gentamicin sulfaat
Cultuur kolven
celincubator
Rode bloedcellen
Toon meer instructies
het kweken van Plasmodium falciparum
1

Stel de cel incubator tot 37 graden Celsius en de gassamenstelling aanpassen aan 1 procent zuurstof , 3 procent kooldioxide en 96 procent stikstof . kopen van 2

Autoclaaf alle niet - steriele apparatuur en materialen

Werken 3 in de laminaire stroming kap om de steriliteit te handhaven , de voorbereiding van de uiteindelijke medium door toevoeging van de volgende handelingen uit om de RPMI 1640 kweekmedium :

D - glucose tot een eindconcentratie van 20 mM .

hypoxanthine tot een eindconcentratie van 0,2 mM .

HEPES een eindconcentratie van 25 mM .

Gentamicine sulfaat tot een eindconcentratie van 25 mg /L.

Albumax II tot een eindconcentratie van 0,5 procent w /v.
4

Verdeel de totale hoeveelheid van het medium in de vorige stap in zoveel kweekflessen zoals gewenst en leg ze op de shaker in de incubator .

Zodra 5 het medium heeft bereikt 37 graden Celsius , voeg de parasiet voorraad .
6

Verander het kweekmedium elke dag naar de parasieten goed gevoed en in leven te houden .
7

Voeg rode bloedcellen om de andere dag . Ze worden besmet door de nieuwe parasieten die worden gegenereerd in de cultuur . Als ze te veel voor een fles , verdeel de inhoud in twee of meer aanvulling zijn.